2024 Συγγραφέας: Elizabeth Oswald | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2024-01-13 00:05
Μπορείτε επίσης να αφαλατώσετε το δείγμα σας με υπερδιήθηση στο 1 δέκατο του προηγούμενου όγκου, που να αραιωθεί ξανά και να επαναλάβετε το βήμα UF. Η καλύτερη μέθοδος αφαλάτωσης είναι η αφαλάτωση με διήθηση γέλης έναντι ρυθμιστικού διαλύματος 50 mM, από την υπερδιήθηση (κλασική, όχι φυγόκεντρη).
Τι είναι η αφαλάτωση στον καθαρισμό πρωτεΐνης;
Η αφαλάτωση χρησιμοποιείται για την αφαίρεση αλάτων από πρωτεϊνικά διαλύματα, φαινόλης ή μη ενσωματωμένων νουκλεοτιδίων από νουκλεϊκά οξέα ή περίσσεια αντιδραστηρίων διασύνδεσης ή επισήμανσης από συζευγμένες πρωτεΐνες.
Πώς καθαρίζετε τις πρωτεΐνες;
Στον καθαρισμό χύδην πρωτεϊνών, ένα κοινό πρώτο βήμα για την απομόνωση πρωτεϊνών είναι καταβύθιση με θειικό αμμώνιο (NH4) 2SO4. Αυτό πραγματοποιείται με την προσθήκη αυξανόμενων ποσοτήτων θειικού αμμωνίου και τη συλλογή των διαφορετικών κλασμάτων της καταβυθισμένης πρωτεΐνης. Στη συνέχεια, το θειικό αμμώνιο μπορεί να αφαιρεθεί με αιμοκάθαρση.
Πώς ρυθμίζετε τις πρωτεΐνες ανταλλαγής;
Ανταλλαγή ρυθμιστικού διαλύματος, ωστόσο, πραγματοποιείται με το πρώτα εξισορροπώντας με τη ρητίνη στήλης με το ρυθμιστικό διάλυμα στο οποίο θα πρέπει να καταλήξει το δείγμα. Και στις δύο περιπτώσεις, τα συστατικά του ρυθμιστικού διαλύματος που μεταφέρουν το δείγμα σε η στήλη θα αντικατασταθεί από τη λύση με την οποία η στήλη είναι προ-ισορροπημένη.
Ποια από τις παρακάτω τεχνικές χρωματογραφίας μπορεί να εφαρμοστεί για την αφαλάτωση πρωτεϊνών;
Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, διήθηση γέλης μπορεί να χρησιμοποιηθεί αποτελεσματικά για πρωτεΐνηαφαλάτωση και επιτυγχάνεται εξισορροπώντας πρώτα τη στήλη διήθησης γέλης με νερό. Ωστόσο, η ανταλλαγή ρυθμιστικού διαλύματος επιτυγχάνεται εξισορροπώντας πρώτα τη ρητίνη στήλης με το ρυθμιστικό διάλυμα στόχου.
Συνιστάται:
Από την πρωτεΐνη ορού γάλακτος;
Ορός γάλακτος είναι το υγρό που απομένει αφού πήξει και στραγγίσει το γάλα. Είναι υποπροϊόν της παρασκευής τυριού ή καζεΐνης και έχει αρκετές εμπορικές χρήσεις. Ο γλυκός ορός γάλακτος είναι ένα υποπροϊόν που προκύπτει από την παρασκευή τύπων πυτιάς σκληρού τυριού, όπως το τσένταρ ή το ελβετικό τυρί.
Έχει την περισσότερη πρωτεΐνη;
Ακολουθεί μια λίστα με 20 νόστιμα φαγητά που είναι πλούσια σε πρωτεΐνη Αυγά. Τα ολόκληρα αυγά είναι από τα πιο υγιεινά και θρεπτικά τρόφιμα που υπάρχουν. … Αμύγδαλα. Τα αμύγδαλα είναι ένα δημοφιλές είδος ξηρών καρπών. … Στηθος κοτόπουλου.
Πώς υδρολύετε την πρωτεΐνη;
Οι πρωτεΐνες υδρολύονται κανονικά στα συστατικά αμινοξέα χρησιμοποιώντας διάλυμα HCl 6N σε "SEALED" σωληνάρια για 24 ώρες. Στο τέλος της υδρόλυσης, το οξύ απομακρύνεται με εξάτμιση υπό κενό. Η προσθήκη 6% θειογλυκολικού οξέος βοηθά στην προστασία των υπολειμμάτων τρυπτοφάνης από την πλήρη καταστροφή κατά την υδρόλυση.
Πώς να υπολογίσετε το άζωτο από την πρωτεΐνη;
Με βάση πρώιμους προσδιορισμούς, η μέση περιεκτικότητα σε άζωτο (Ν) των πρωτεϊνών βρέθηκε να είναι περίπου 16 τοις εκατό, γεγονός που οδήγησε στη χρήση του υπολογισμού N x 6,25 (1/0,16=6,25) για μετατροπή της περιεκτικότητας σε άζωτο σε περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη.
Μπορεί η υπερήχηση να καταστρέψει την πρωτεΐνη;
Δεδομένου ότι η η υπερήχων μπορεί δυνητικά να αποικοδομήσει πρωτεΐνες και να μετουσιώσει πρωτεϊνικούς επιτόπους, στη συνέχεια αξιολογήσαμε την επίδραση της υπερήχων στην ακεραιότητα της πρωτεΐνης. Μπορεί η υπερήχηση να βλάψει τις πρωτεΐνες;