Η
Luciferin είναι ένας κοινός βιοφωταύγιος ανταποκριτής που χρησιμοποιείται για in vitro απεικόνιση της έκφρασης της λουσιφεράσης. Αυτό το υδατοδιαλυτό υπόστρωμα για το ένζυμο λουσιφεράση Firefly (συνήθως από το Photinus pyralis) χρησιμοποιεί ATP και Mg2+ ως συμπαράγοντες για να εκπέμπει μια χαρακτηριστική κιτρινοπράσινη εκπομπή παρουσία οξυγόνου.
Τι κάνει η D-Luciferin;
ΗΗ λουσιφερίνη είναι μια κοινή βιοφωταύγεια αναφορά που χρησιμοποιείται για in vivo απεικόνιση της έκφρασης της λουσιφεράσης . Αυτό το υδατοδιαλυτό υπόστρωμα για το ένζυμο λουσιφεράση της πυγολαμπίδας χρησιμοποιεί ATP και Mg2+ ως συμπαράγοντες για να εκπέμπει μια χαρακτηριστική κιτρινοπράσινη εκπομπή παρουσία οξυγόνου, το οποίο αλλάζει σε κόκκινο φως in vivo στους 37°C.
Τι είναι το κάλιο D-Luciferin;
Λεπτομέρειες. Το άλας καλίου D-Luciferin είναι ένα χρήσιμο υπόστρωμα για το ένζυμο Firefly Luciferase. Κατά την οξείδωση από το ένζυμο λουσιφεράση, παράγει βιοφωταύγεια. Η D-luciferin μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της έκφρασης του γονιδίου της λουσιφεράσης που συνδέεται με έναν προαγωγέα ενδιαφέροντος.
Πώς φτιάχνετε την D-Luciferin;
1. Ετοιμάστε ένα 200X μητρικό διάλυμα λουσιφερίνης (30 mg/ml) σε αποστειρωμένο νερό. Ανακατεύουμε απαλά με αναστροφή μέχρι να διαλυθεί πλήρως η λουσιφερίνη. Χρησιμοποιήστε αμέσως ή ποσώστε και καταψύξτε στους -20°C για μελλοντική χρήση.
Πώς κάνετε την ένεση λουσιφερίνης;
(Η λουσιφερίνη συνήθως χορηγείται είτε ενδοπεριτοναϊκά ή ενδοφλέβια.) Παράδειγμα: Ένεση με 10 µLΜητρικό διάλυμα λουσιφερίνης ανά γραμμάριο σωματικού βάρους (κανονικά ~200 µL για ένα ποντίκι 20 g για μια τυπική ένεση 150 mg/kg). 5. Περιμένετε 10-20 λεπτά πριν από την απεικόνιση για μέγιστο επίπεδο σήματος λουσιφεράσης.
