Τι είναι το στοιχείο ελέγχου φόρτωσης στο western blot;

Τι είναι το στοιχείο ελέγχου φόρτωσης στο western blot;
Τι είναι το στοιχείο ελέγχου φόρτωσης στο western blot;
Anonim

Τα αντισώματα ελέγχου φόρτωσης είναι σημαντικοί έλεγχοι καθώς υποδεικνύουν την ίση φόρτωση δειγμάτων σε όλα τα φρεάτια. Οι έλεγχοι φόρτωσης υποδεικνύουν επίσης τη σωστή μεταφορά πρωτεϊνών στη μεμβράνη κατά τη διάρκεια της διαδικασίας western blotting. Τα στοιχεία ελέγχου φόρτωσης είναι συνήθως πρωτεΐνες με υψηλή και πανταχού παρούσα έκφραση.

Τι κάνει ένα στοιχείο ελέγχου φόρτωσης;

Ένας έλεγχος φόρτωσης είναι μια πρωτεΐνη που χρησιμοποιείται ως έλεγχος σε ένα πείραμα Western blotting. … Χρησιμοποιούνται για να διασφαλιστεί ότι η πρωτεΐνη έχει φορτωθεί εξίσου σε όλα τα φρεάτια.

Γιατί χρησιμοποιούμε ένα στοιχείο ελέγχου φόρτωσης στο Western blot;

Τα στοιχεία ελέγχου φόρτωσης έχουν έναν δεύτερο ρόλο ως στοιχείο ελέγχου στα western blots. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν για να ελέγξετε ότι έχει γίνει ομοιόμορφη μεταφορά από το τζελ στη μεμβράνη σε ολόκληρο το gel. Αυτό είναι επιβεβλημένο όταν γίνονται συγκρίσεις των επιπέδων έκφρασης πρωτεΐνης μεταξύ των δειγμάτων.

Πώς χρησιμοποιείτε το στοιχείο ελέγχου φόρτωσης στο Western blot;

Τα σήματα από τα στοιχεία ελέγχου φόρτωσης χρησιμοποιούνται συνήθως για την κανονικοποίηση των σημάτων από τις πρωτεΐνες ενδιαφέροντος. Για να χρησιμοποιήσετε έναν έλεγχο φόρτωσης για αυτούς τους σκοπούς, η ανίχνευση με πρωτεϊνικό αντίσωμα ελέγχου και το πειραματικό αντίσωμα θα πρέπει να γίνει στο ίδιο στύπωμα. Μια ποικιλία διαφορετικών πρωτεϊνών χρησιμοποιείται ως έλεγχοι φόρτωσης.

Γιατί χρησιμοποιείται η ακτίνη ως έλεγχος φόρτωσης;

Βήτα-ακτίνη, χρησιμοποιείται συνήθως ως έλεγχος φόρτωσης για Western Blot σεομαλοποιήστε τα επίπεδα πρωτεΐνης που ανιχνεύθηκαν επιβεβαιώνοντας ότι η φόρτωση πρωτεΐνης είναι ίδια σε όλο το τζελ.

Συνιστάται: