Επωάστε το δοχείο σε εύκρατο δωμάτιο για 2-3 λεπτά . Τα σταθερά προσκολλημένα κύτταρα μπορούν να αποκολληθούν γρήγορα στους 37 °C. Παρατηρήστε τα κύτταρα στο μικροσκόπιο. Τα αποκολλημένα κύτταρα φαίνονται στρογγυλεμένα και διαθλαστικά στο μικροσκόπιο.
Τι θα συμβεί εάν κάνετε θρυψινοποίηση κυττάρων για πολύ;
Η επώαση κυττάρων με πολύ υψηλή συγκέντρωση θρυψίνης για πολύ μεγάλο χρονικό διάστημα θα βλάψει τις κυτταρικές μεμβράνες και θα σκοτώσει τα κύτταρα. Εάν δεν είστε σίγουροι για τη συγκέντρωση θρυψίνης που θα χρησιμοποιήσετε, χρησιμοποιήστε χαμηλή συγκέντρωση.
Πώς θρυψινοποιείτε τα κύτταρα;
Τα κύτταρα μπορούν να εναιωρηθούν εκ νέου με μεταφέροντας απαλά με πιπέτα το αιώρημα κυττάρων για να σπάσουν τα μπλοκ. Περαιτέρω αραίωση μπορεί να γίνει, εάν απαιτείται, για τον αριθμό των κυττάρων και/ή την υποκαλλιέργεια.
Πόση ώρα χρειάζεται για να προσκολληθούν τα κύτταρα;
τα πρώτα κελιά συνδέονται ήδη μετά το 3-5 λεπτά! Από την εμπειρία μου, τα περισσότερα EC προσαρτήθηκαν μετά από 10-20 λεπτά. Αλλά όσο περισσότερο περιμένετε, τόσο πιο σταθερή είναι η προσκόλληση.
Είναι κακό να τρυψίνουμε κύτταρα δύο ημέρες στη σειρά;
Ναι, είναι επιβλαβές εάν κάνετε συνεχή θρυψινοποίηση των κυττάρων σας μετά από 24 ώρες διαχωρισμού. Συνιστάται να κάνετε διάσπαση μετά από 48 ώρες διαχωρισμού. … Μπορείτε να διατηρήσετε τα κύτταρα έως ότου η μορφολογία είναι καλή (Εξαρτάται από τον τύπο του κυττάρου σας, ορισμένα κύτταρα μπορούν να ανεβούν έως και 80 διελεύσεις και μερικά έως και 10).
