Τα περασμένα χρόνια, η Coriell χρησιμοποίησε όλο τον αδρανοποιημένο με θερμότητα ορό για τις κυτταροκαλλιέργειές της για να αδρανοποιήσει την πρωτεΐνη του συμπληρώματος που βρίσκεται στον ορό νεογέννητων μόσχου. Δεδομένου ότι έχουμε αλλάξει σε εμβρυϊκό βόειο ορό, διαπιστώνουμε ότι η απενεργοποίηση θερμότητας είναι δεν είναι απαραίτητη για τις περισσότερες κυτταρικές σειρές.
Πόσο καιρό θερμαίνετε το FBS απενεργοποιημένο;
Το ακόλουθο πρωτόκολλο προτείνεται για τη θερμική απενεργοποίηση του εμβρυϊκού βόειου ορού (FBS). Το FBS θερμαίνεται στους 56±2°C για 30±2 λεπτά σε αναδευόμενο υδατόλουτρο. Απενεργοποίηση θερμότητας (HI) – μια διαδικασία με την οποία το FBS διατηρείται σε θερμοκρασία 56±2° για 30±2 λεπτά.
Γιατί είναι απαραίτητη η απενεργοποίηση θερμότητας για το FBS πριν από τη χρήση;
Μια κοινή θεραπεία του FBS είναι η απενεργοποίηση θερμότητας, όπου το FBS θερμαίνεται στους 56°C για 30 λεπτά σε λουτρό νερού με περιστασιακή ανακίνηση. Ο σκοπός είναι να αδρανοποιήσει οποιαδήποτε συστατικά του συστήματος συμπληρώματος υπάρχουν στο FBS [24], και άλλους πιθανούς άγνωστους αναστολείς της κυτταρικής ανάπτυξης.
Γιατί πρέπει να θερμάνετε τον αδρανοποιημένο ορό;
Ο στόχος της απενεργοποίησης θερμότητας είναι να καταστρέψει τη δραστηριότητα του συμπληρώματος στον ορό χωρίς να επηρεαστούν τα χαρακτηριστικά που προωθούν την ανάπτυξη του προϊόντος. Η αφαίρεση της δραστηριότητας του συμπληρώματος από τον ορό δεν απαιτείται για τις περισσότερες κυτταρικές καλλιέργειες, αλλά μπορεί να είναι απαραίτητη για καλλιέργειες που είναι ευαίσθητες στη δραστηριότητα του συμπληρώματος.
Πώς αποθηκεύετε το FBS απενεργοποιημένο με θερμότητα;
Προστατέψτε το αποψυγμένο FBS και άλλους ορούς με ασφαλή ψύξη καιαποθήκευση. Χρησιμοποιήστε αμέσως αποψυγμένο ορό. Το υγρό FBS και ο άλλος ορός μπορούν να φυλάσσονται στο ψυγείο (2 έως 8 °C) έως τέσσερις εβδομάδες.
